rev. 2021-9-24 22:24 ŠK
Homogenizujte 5 g testovaného materiálu v 25 ml acetónu, umiestnite do Erlenmayerovej banky (250 ml) a zahrievajte na vodnom kúpeli pri teplote 80 - 90 °C počas 2 - 5 minút. Po ochladení prefiltrujte supernatant cez Na2SO4. Koncentrujte odparením acetónu na objem 1-2 ml.
Tenkovrstvová chromatografia
Extrakty a štandardy sa nanášajú na platne mikropipetami vo vzdialenosti 2 cm od spodného okraja platne a v intervaloch 1,5 cm v objeme 5 ml. Po dôkladnom vysušení sa platňa umiestni do chromatografickej komory. Keď čelo rozpúšťadla dosiahne výšku 15 cm, doska sa vyberie z komory a suší sa pri izbovej teplote, kým sa nevytratí zápach rozpúšťadla. Platňa sa potom postrieka vhodnou vývojkou. Identifikácia hľadanej látky sa vykonáva porovnaním so štandardnou látkou na základe hodnoty Rr a farby škvŕn. Rf sa vypočíta z pomeru vzdialenosti, ktorú prejde látka, a vzdialenosti, ktorú prejde rozpúšťadlo.
Extrakčná zmes: Acetón : hexán (1:1)
Detekcia: Prehliadnite platňu pod ÚV lampou a označte chromatografické škvrny ceruzkou. Potom platňu postriekajte jemným sprayom zmesi 15% FeCl3 a 1% K3Fe(CN)6 (zmes pripravte tesne pred použitím v pomere 1:1). Roztok je stály 5 minút.
Warfarínová škvrna štandardu je modrá škvrna na žlto-zelenom pozadí. V pozitívnom prípade sa objaví rovnaká škvrna aj vo vzorke.
https://s3-us-west-2.amazonaws.com/secure.notion-static.com/c2c2a765-7190-42a4-ba64-984926fc0a29/warfarin-small.mp4