Stanovenie herbicídov MCPA a DNOK v biologických materiáloch

rev. 2021-9-25 17:49 ŠK

1. Stanovenie herbicídu MCPA pomocou metódy TLC

Postup

MCPA sa extrahuje z pečene zmesou etanolu, dietyléteru a kyseliny sírovej. Po prečistení extraktu sa identifikuje tenkovrstvovou chromatografiou (TLC) za použitia detekčného činidla - bromtymolovej modrej.

Extrakcia

Zhomogenizujte v trecej miske 10 g testovaného materiálu. Homogenát preneste do Erlenmayerovej banky, pridajte 25 ml 96 % etanolu, 50 ml dietyléteru a 3 ml zriedenej H2SO4 (1:3) a 15 minút pretrepávajte. Celú zmes prefiltrujte priamo do oddeľovacieho lievika a začnite purifikačný postup.

https://s3-us-west-2.amazonaws.com/secure.notion-static.com/90192759-bf71-4f1c-968d-4b8937cc9ebd/MCPA_sample_preparation.mp4

Purifikačný postup

  1. Filtrát v deliacom lieviku pretrepte so 100 ml vody a 3 ml zriedenej H2SO4 a nechajte usadiť. Potom oddeľte dietyléterový podiel (vrchná vrstva).
  2. Do oddeleného podielu pridajte 20 ml 2% diofosforečnanu tetrasódneho Na4P2O7, pretrepte 3-5 minút a nechajte usadiť, kým sa vytvoria dve fázy. Oddeľte diofosforečnanový podiel (spodná vrstva).
  3. Získaný diofosforečnanový podiel okyslite pridaním 3 ml zriedenej H2SO4, pridajte 10 ml chloroformu a pretrepávajte 3-5 min. Potom oddeľte chloroformový podiel (spodná vrstva). Spojený chloroformový extrakt vysušte bezvodým Na2SO4 a nechajte odpariť na porcelánovej miske.

https://s3-us-west-2.amazonaws.com/secure.notion-static.com/6956279b-f811-411b-a2b4-24fcb0647f23/MCPA_oddelovanie_frakcii.mp4

Detekcia

Rozpustite odparok v 1 ml 98% etanolu a naneste ho mikropipetou na TLC platňu spolu so štandardom MCPA (po 5 ml). Vyvolávajte platňu v systéme etanol : amoniak (2 : 1). Keď čelo rozpúšťadla dosiahne výšku 15 cm, vyberte dosku z komory a sušte pri izbovej teplote, kým sa nevytratí zápach rozpúšťadla. Potom nastriekajte na dosku jeden z dostupných vývojových prípravkov. Po vychladnutí detegujte s roztokom bromtymolovej modrej.

https://s3-us-west-2.amazonaws.com/secure.notion-static.com/18ba6aac-99ea-4ba2-b9c7-046a9bfa823a/MCPA_chromatografia.mp4